产品中文名：小鼠CD8分子(CD8)酶联免疫吸附测定试剂盒

指标别名：alpha polypeptide (p32); CD8; CD8 antigen alpha polypeptide; CD8 antigen alpha polypeptide (p32); CD8a; CD8A antigen; CD8A molecule; 
CD8A_HUMAN; Leu2; Leu2 T lymphocyte antigen; Ly3; LYT3; MAL; OKT8 T cell antigen; OTTHUMP00000160760; OTTHUMP00000160764; OTTHUMP00000203528; OTTHUMP00000203721; p32; T cell antigen Leu2; T cell co receptor; T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain; T-lymphocyte differentiation antigen T8/Leu-2; T8 T cell antigen; T8/Leu-2 T-lymphocyte differentiation antigen

指标简介：CD8分子(CD8)是一种跨膜糖蛋白，作为 T 细胞受体 (TCR) 的共同受体。与 TCR 一起，CD8 共受体在 T 细胞信号传导和帮助细胞毒性 T 细胞抗原相互作用中发挥作用。与 TCR 一样，CD8 与主要组织相容性复合体 (MHC) 分子结合，但对 MHC I 类蛋白具有特异性。它有两种同种型，α 和β，每种都由不同的基因编码。CD8-α 的细胞外 IgV 样结构域与 I 类 MHC 分子的 α3 部分相互作用。这种亲和力使细胞毒性 T 细胞的 T 细胞受体和靶细胞在抗原特异性激活过程中紧密结合在一起。除了帮助细胞毒性 T 细胞抗原相互作用外，CD8 共受体还在 T 细胞信号传导中发挥作用。

检测范围：0.156–10ng/ml

灵敏度：＜0.031ng/ml

精密度：板内变异系数均＜9%，板间变异系数均＜10%

保存温度：4℃

有效期：6 个月

检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒提供的酶标板已包被捕获抗体，实验时将待检样品（或标准品）加入酶标板反应孔中，捕获抗体结合目的蛋白。加入生物素标记检测抗体与目的蛋白结合，再加入 SABC 与标记抗体结合，形成捕获抗体-目的蛋白-检测抗体-SABC 免疫复合物，游离成分均被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处检测吸光度(OD)，目的蛋白浓度与 OD450 值之间呈正相关，通过绘制标准曲线计算出样品中目的蛋白的浓度。

样品的收集和保存：

1、血清：全血样品于室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 4℃，1,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或将上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

2、血浆：用 EDTA 或肝素钠抗凝管采集全血样品，采集后 30 分钟内置于 4℃冰箱，1,000×g 离心 15分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

3、组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01mol/L， pH=7.4) 清洗组织，去除残留血液，冰上切割组织后称重。按组织重量(g): PBS 体积(ml) =1:9 的比例，加入 9 倍体积的 PBS（比如 1g 的组织样品加入 9ml 的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录），加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎以充分匀浆。最后将匀浆液于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测（如需要可取部分上清进行 BCA 蛋白定量）。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

4、细胞裂解液：贴壁细胞用预冷的 PBS 轻轻清洗，胰蛋白酶消化，1,000×g 离心 5 分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。收集到的细胞用预冷的 PBS 洗涤 3 次。PBS 稀释细胞悬液，细胞浓度达到10^6个/ml 左右。通过反复冻融或超声破碎使细胞裂解。4℃，3,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

5、细胞培养上清或其他生物体液：收集液体后于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。样本处理相关试剂推荐：PBS 缓冲液（货号：U21-259B），0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液（货号：U31-323C），0.25%胰蛋白酶消化液（货号：U31-324C）。

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