产品描述：

GW4869是一种具有细胞渗透性、非竞争性的N-SMase（中性鞘磷脂酶）抑制剂，是外泌体合成/释放的抑制剂，IC50值为1μM。

GW4869对N-SMase具有选择性，在浓度高达150μM时对酸性SMase没有抑制作用。它能阻断神经酰胺介导的多泡体萌芽从而抑制多泡体释放外泌体，是常用的抑制外泌体生成的药物。

GW4869在体外细胞模型中抑制N-SMase。GW4869并不显著地破坏TNF诱导的NF-κB易位入核，因此，GW4869不干涉TNF介导的其他关键信号作用。通过检测核浓染、caspase激活、PARP的降解以及台盼蓝吸收发现，GW4869能以浓度依赖方式保护细胞免于死亡，同时显著抑制细胞色素C从线粒体中的释放以及caspase9的激活，因此N-SMase的激活应位于线粒体线粒体功能障碍的上游。在浓度高达150μM时，GW4869对克隆的人源A-SMase没有抑制作用，对其他水解酶如细菌磷脂酰胆碱-PLC和牛源PP2A没有或仅具有微弱抑制活性，而相对于人源lyso-PAF PLC，对大鼠大脑中此酶的活性更为显著。

GW4869全身用药并不改变肝脏、心脏或骨骼肌中神经酰胺或鞘磷脂的含量，但减少了脑中神经酰胺的含量、增加了鞘磷脂含量。通过GW4869抑制nSMase2可延缓学习，在给小鼠使用GW4869后，没有减少其在反复训练后找到隐蔽平台的延迟，说明它们对应用空间线索进行导航的学习障碍。对小鼠腹腔注射以GW4869会减少其脑部和血清中外来体、脑部神经酰胺以及Aβ1-42斑块负荷的水平。GW4869在体内通过阻止外来体分泌减少淀粉样斑块形成，在达到抑制nSMase2引起的生理效应的浓度（即有效浓度）下，GW4869具有较少毒性。

使用说明：

一、细胞实验（体外实验）

1、接种细胞于10cm培养皿中，在完全培养基中培养至细胞数量达到1.7×106个时，将培养基更换为7ml含2% FBS和25mM HEPES (pH7.5)的RPMI 1640培养基，在培养箱中静置孵育2h。

2、将GW6849用DMSO配制成1.5mM储存液，储存于-80℃。使用前，加入5%甲基磺酸(MSA)到GW4869储存液中进行溶解，此时GW4869的浓度为1.43mM，将悬浮液充分混匀，37℃加热直至溶液澄清。

3、将GW4869抑制剂加入到细胞培养基中，工作液浓度范围：10-20μM，处理细胞30min。

二、动物实验（体内实验）

GW4869试剂按约1.25mg/kg的剂量处理完全缺失nSMase2活性的小鼠（C57BL/6J小鼠）。

注意事项：

1、本产品在使用过程中应注意无菌操作，避免污染。

2、本产品仅作体外科研使用，不可用于临床诊断或治疗。

3、实验员请穿实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

保存方法：

冰袋运输。粉末-20℃干燥保存，有效期3年。建议分装后-20℃干燥保存。储存液-80℃保存，6个月有效；-20℃保存，1个月有效。避免反复冻融。

使用范围：

仅限科研使用，不能应用于临床。