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五标多重免疫荧光试剂盒

货号:YB008
产品规格: 100T
检测物种:
应用范围: 免疫组化
产品类型: 免疫组化试剂盒
保存温度: -20°C
产地: YOBIBIO
价格:9875 元

五标多重免疫荧光试剂盒

【产品原理】

酪酰胺信号放大(TSA,Tyramide signal amplification)技术是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶 蛋白进行标记的酶学检测方法,类似常规免疫组化的 DAB 显色方法,TSA 技术同样采用 HRP 标记 的二抗,同样有对应的显色步骤(HRP 催化加入反应体系的酪胺荧光素底物,产生活化荧光底 物,活化底物可与抗原上的酪氨酸等残基共价结合,使样品上稳定的共价结合酪胺荧光素。之后用 热修复法洗去非共价结合的一抗-二抗-HRP 复合物,重复下一种一抗-HRP 二抗来第二轮孵育,换另 一种酪胺荧光素底物,如此往复就可实现多重标记。

TSA 详细原理是利用酪胺 Tyramide 的过氧化物酶反应(酪胺盐在 HRP 催化 H202 下形成共价键结合位 点) ,产生大量的酶促产物,该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合, 这样在抗原-抗体结合部位就有大量的荧光素沉积,结果使其检测信号得到 10- 100 倍增强。简单来说, 用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的 HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入 体系的非活性荧光素。荧光素在 HRP 和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶 联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波或煮沸或者水浴等热修复处理,前一轮非共价结合 的抗体被洗掉,共价结合的荧光素稳定共价结合在样本切片蛋白上。再换个一抗来第二轮孵育,周 而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,最后去检测结果。 由于每次体系中都只有单 一抗体孵育,因此无需担心抗体交叉反应, 以及一抗二抗种属匹配问题,大大减少了实验设计时不 同种属抗体选择匹配的限制。也就是说,如果用 TSA 技术,同一张片子上所有的靶标都可以选用特 异性高的兔单克隆抗体。搭配同一支抗兔的多聚 HRP 二抗就可以进行实验,而且信号放大的倍数大 大增强。本公司开发的试剂盒具体酪胺荧光染料为以下其中一种或者多种:TYR-480 ,TYR-520 , TYR-570 ,TYR-620 ,TYR-690 ,TYR-780 。此试剂盒中的荧光染料可单独或配合使用。可以实现单 标、双标、三标以及更多重荧光放大/多重同源抗体荧光标记等功能,极大丰富了此试剂盒的内涵。

【产品规格】100T

【产品货号】YB008

【储存温度】-20℃ , 一年有效

【产品组成】

名称

规格

保存条件

TYR-520  荧光染料

5ml(即用型)

-20

TYR-570  荧光染料

5ml(即用型)

-20

TYR-620  荧光染料

5ml(即用型)

-20

TYR-690  荧光染料

5ml(即用型)

-20

TYR-780  荧光染料

5ml(即用型)

-20

TSA+增强剂

10μl*5

-20

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