产品中文名：大鼠甲状旁腺素(PTH)酶联免疫吸附测定试剂盒

指标别名：Parathyroid Hormone；FIH1;PTH1;iPTH;Intact Parathyroid Hormone;Parathormone;Parathyrin

指标简介：甲状旁腺素（PTH），又称副甲状腺素，是一种由甲状旁腺分泌的多肽激素， 通过对骨骼、肾脏和肠道的影响来调节血清钙浓度。PTH 影响骨重塑，而骨 重塑是一个持续的过程，随着时间的推移，骨组织会交替地被吸收和重建。 PTH 是在血清钙（Ca2+）水平较低时分泌的。PTH 间接刺激骨基质内破骨 细胞的活动，以释放更多的离子钙（Ca2+）到血液中，提高低血清钙水平。 PTH 主要由甲状旁腺的主细胞分泌，它是一种含有 84 个氨基酸的多肽，分 子质量约为 9500Da，是一种原激素，它的作用受到降钙素的反对。PTH 受 体有两种类型，甲状旁腺激素 1 受体由 PTH 的 34 个 N 端氨基酸激活，大量 存在于骨骼和肾脏细胞中，甲状旁腺激素 2 受体大量存在于中枢神经系统、 胰腺、睾丸和胎盘的细胞中。产生 PTH 过少或过多的疾病，如甲状旁腺功能 减退症、甲状旁腺功能亢进症和副肿瘤综合征，可引起骨病、低钙血症和高 钙血症。

检测范围：15.6–1000pg/mL

灵敏度：＜2.84pg/ml

精密度：板内变异系数均＜9%，板间变异系数均＜10%

保存温度：4℃

有效期：6 个月

检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒提供的酶标板已包被捕获抗体，实验时将待检样品（或标准品）加入酶标板反应孔中，捕获抗体结合目的蛋白。加入生物素标记检测抗体与目的蛋白结合，再加入 SABC 与标记抗体结合，形成捕获抗体-目的蛋白-检测抗体-SABC 免疫复合物，游离成分均被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处检测吸光度(OD)，目的蛋白浓度与 OD450 值之间呈正相关，通过绘制标准曲线计算出样品中目的蛋白的浓度。

样品的收集和保存：

1、血清：全血样品于室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 4℃，1,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或将上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

2、血浆：用 EDTA 或肝素钠抗凝管采集全血样品，采集后 30 分钟内置于 4℃冰箱，1,000×g 离心 15分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

3、组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01mol/L， pH=7.4) 清洗组织，去除残留血液，冰上切割组织后称重。按组织重量(g): PBS 体积(ml) =1:9 的比例，加入 9 倍体积的 PBS（比如 1g 的组织样品加入 9ml 的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录），加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎以充分匀浆。最后将匀浆液于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测（如需要可取部分上清进行 BCA 蛋白定量）。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

4、细胞裂解液：贴壁细胞用预冷的 PBS 轻轻清洗，胰蛋白酶消化，1,000×g 离心 5 分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。收集到的细胞用预冷的 PBS 洗涤 3 次。PBS 稀释细胞悬液，细胞浓度达到10^6个/ml 左右。通过反复冻融或超声破碎使细胞裂解。4℃，3,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

5、细胞培养上清或其他生物体液：收集液体后于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。样本处理相关试剂推荐：PBS 缓冲液（货号：U21-259B），0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液（货号：U31-323C），0.25%胰蛋白酶消化液（货号：U31-324C）。

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