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外泌体提取试剂盒(细胞上清)标准版

应用范围: 细胞上清
产品类型: 外泌体提取
保存温度: 室温
产地: YOBIBIO
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产品描述:

外泌体(Exosomes)是一种直径为30-200nm的微小囊泡,可由机体众多类型细胞释放,并广泛分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息。

目前外泌提取主要有超速离心、试剂盒提取等方法,其中通过超速离心法分离得到的外泌体纯度高,可满足于后续不同实验的需求,但是仪器要求高,周期长,工作量大。本试剂盒可以快速从细胞培养上清中获得大量完整的外泌体颗粒,实验室普通离心机就可以完成,提取的外泌体适用于下游的细胞共培养、电镜、分析、Western Blot、qPCR和高通量测序等应用。

使用说明:

一、样品预处理:

1、收集新鲜的细胞培养上清样品,置于冰上待用;若为冻存样品,可25℃水浴解冻,待完全融化后置于冰上待用。

2、样品转移至离心管中,4℃,3000×g离心10 min,弃沉淀(细胞碎片),转移上清至新离心管中。

二、外泌体分离:

1、使用前先将外泌体抽提试剂充分混匀。

2、向样品中加入1/4倍样本体积的外泌体抽提试剂,涡旋振荡1min,静置4℃冰箱中2-3h。

3、离心:取出装有混合液的离心管,4℃,10,000×g离心60min,弃上清,收集富含外泌体的沉淀。

4、再次离心:将含有沉淀的离心管再次于4℃,10,000×g离心2min,弃上清,请尽可能吸尽上清液。

5、重悬:取适量的1×PBS吹打重悬沉淀,并转移至新的1.5ml离心管中(建议每20ml细胞培养上清的外泌体用约200μl的1×PBS重悬)。

6、收获外泌体颗粒:将含有重悬液的1.5ml离心管于4℃,12,000×g离心2min,保留上清液,其中富含外泌体颗粒(若沉淀较多,重复离心操作多次至无明显沉淀,每次离心后取上清液)。

注意事项:

1、为了确保获得的外泌体来自于培养细胞,建议使用无外泌体血清(货号:U45-852A)培养细胞。

2、本产品只针对细胞培养上清来源的外泌体分离,不适用其他来源的外泌体抽提。

3、本产品仅作体外科研使用,不可用于临床诊断或治疗。

4、实验员请穿实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

保存方法:

室温保存,一年有效。

使用范围:

仅限科研使用,不能应用于临床。

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