一、实验简介

脑出血（Intracerebral Hemorrhage，ICH）是指非外伤性脑实质内血管破裂引起的出血，占全部脑卒中的20%-30%，急性期病死率为30%-40%。目前脑出血造模方法主要为脑立体定位注射自体血或者胶原酶。

脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia-reperfusion injury）是指脑缺血致脑细胞损伤，恢复血液再灌注后，其缺血性损伤反而进一步加重的现象。大脑中动脉阻塞（MCAO）模型是研究缺血性脑中风的经典动物模型。常使用线栓法造模无需开颅、对全身影响小、缺血部位恒定、可进行再灌注损伤研究等优点而被广泛采用。

二、实验流程

（一）动物造模

1、脑出血模型

（1）胶原酶注射法

胶原酶是一种蛋白水解酶，通过脑立体定位注射入脑后，破坏血管基底膜及细胞间基质中的胶原蛋白，导致血管受损，血液外渗以建立脑出血模型。胶原酶分为Ⅰ-Ⅷ型，其中Ⅳ型和Ⅶ型经常用来制备脑出血模型。

大鼠使用水合氯醛腹腔注射麻醉消毒后固定，颅骨转孔，使用立体定位仪定位大鼠脑一侧尾状核，将微量注射器针头插入脑组织尾状核，分别分组注入0.5U胶原酶（Ⅳ型或Ⅶ型），连续观察10-20 min后即可见发生出血，且出血后症状明显、持续时间较长。

（2）自体血注射法

大鼠使用水合氯醛腹腔注射麻醉并固定在脑立体定位仪上，消毒后按中线位置切开头皮，去骨膜，显露前囟，充分止血，用高速牙科颅钻在颅骨上钻孔（直径约2 mm）至硬脑膜可见，坐标为：前囟前0.2mm，旁开3.5mm，深5.5mm，此部位为大鼠纹状体区域。使用胰岛素针取股动脉血或尾动脉血，立即缓慢匀速注射，停留一段时间后缓慢拔出，将骨孔用骨蜡封闭，仔细消毒并缝合切口。

2、脑缺血再灌注损伤模型

大鼠麻醉固定后，分离颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA）。结扎ECA远端，暂时夹闭CCA和ICA。在ECA上剪一小口，将线栓插入ICA，向颅底推进至有轻微阻力（约18-22mm），阻塞MCA。缺血一段时间（60-90min）后抽出线栓恢复血流。

（二）模型评价

1、行为学检测：转棒实验、平衡木行走、水迷宫实验、Y迷宫实验、新物体识别实验、旷场实验等。

2、病理检测：脑HE染色、脑尼氏染色、脑免疫荧光等。

三、注意事项

1、客户需要提供实验药物和实验方案。

2、我们完成动物造模、给药处理、行为学检测、组织取材及病理实验等服务。

四、联系咨询

攸碧艾欢迎您来电咨询实验服务，联系电话：400-681-8582。