石蜡切片是组织学常规制片技术中为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织形态变化的主要方法。
石蜡切片适用于形态学观察和组织结构的长期保存,常用于常规的HE染色、特殊染色(如Masson、PAS)或免疫组化(IHC)等实验。
1、切片:将包埋好的蜡块固定于轮转式切片机上,调整蜡块切面与切片刀口平行并旋紧。根据组织类型调整切片厚度,摇动切片机手轮进行切片。先进行粗切,厚度大约为15-30μm左右,质地较硬或组织较小的组织的粗切厚度应更薄,甚至不能粗切。粗切至组织完全暴露后,再进行细切,一般为3-5μm。细切至组织块表面均匀一致,无白点,用毛笔轻托切出的连续蜡带。切片时要求用力均匀,柔和,摇速不宜过快或过慢。切片的要求是完整、薄、均匀。
2、展片与贴片:将蜡带或单个蜡片光亮面向下,平铺于40-45°C的恒温水浴中,利用水温使蜡片自然展平无皱褶。用防脱载玻片捞起展平的蜡片,并摆正其在玻片上的位置。
3、烤片:将贴附好的玻片置于60°C恒温箱中干燥2小时,使蛋白质凝固,从而让切片牢固附着于载玻片上。水烤干、蜡烤化后取出玻片常温保存备用。
1、客户提供已固定但未包埋的组织样本用于石蜡包埋和切片。组织离体后,选择合适的固定液和容器立即固定,固定液的量建议大于组织体积的10-15倍,固定时间建议24-48h,大标本固定12h,再切开固定。标本常温(25℃左右)或冷藏(4℃)固定,切勿冷冻结冰。 固定样本常温运输送样。运输过程中务必做好标识,避免样本混淆。
2、客户提供编号清晰的蜡块或蜡头用于石蜡切片,建议每个蜡块多切几张备用,如果是需要做多种染色或组化荧光建议连续切片一次性将需要做的染色片子预留出来备用,防止浪费蜡块组织,默认做防脱切片。
3、特殊结构或部位送样时请附图谱或者说明,确保能够快速准确切到该区域。
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