一、实验简介

冰冻包埋是一种快速冷冻组织样本的技术，通过OCT包埋剂包裹组织并保存，通常用于冰冻切片。由于OCT一种水溶性混合物，冰冻切片在水中漂洗后即溶解，在后续染色中不会增加背景染色。OCT可以支撑组织，增加组织的连续性，减少褶皱及碎裂。不同于石蜡包埋，OCT包埋的样本需要低温-20℃保存，可以保存固定标本和新鲜标本。

冰冻包埋可最大程度保留蛋白质抗原性、酶活性及RNA完整性，适用于免疫荧光、原位杂交、快速病理诊断及脂肪或脑组织研究。

二、实验流程

1、样本预处理：组织离体后立即置于冰上，用锋利刀或剪将其修剪为≤0.5cm³小块。预冷PBS冲洗后吸干表面液体（减少冰晶形成）。如果需要优化形态，用4%多聚甲醛4℃下固定30min；如国需要保留酶活性则无需固定。  

2、OCT包埋:  OCT包埋剂冰上预冷后，滴加少量OCT至包埋模具底层，将组织待观察面朝下轻置于模具中央，补充OCT至完全覆盖组织，操作过程中注意避免气泡（可用针尖挑破或轻震模具）。  

3、快速冷冻：将包埋模具浸入液氮预冷的异戊烷（-150℃）中5s，或置于-80℃冷冻台10min。OCT完全变白固化后转移至-80℃保存。  

三、注意事项

1、客户需提供干冰保存运输的新鲜组织或常温固定液保存的组织。

2、客户应使用合适的容器存放组织，不宜过小，不能用玻璃瓶，不能漏液。标本瓶上应编号清楚，尽量简易。

3、我们提供自封袋低温保存的OCT包埋块。

4、OCT包埋块一旦解冻，不可重新冷冻使用。

四、联系咨询

攸碧艾欢迎您来电咨询实验服务，联系电话：400-681-858。