-
-
实验服务
-
新闻资讯
shRNA（short hairpin RNA，短发夹RNA）是一种通过RNA干扰（RNAi）机制实现基因特异性沉默的有效工具。shRNA分子包含两个短反向重复序列，中间由一个茎环（loop）序列分隔，形成发夹结构。当克隆到表达载体中时，shRNA通常由pol Ⅲ启动子控制转录，并在末端连接5-6个T作为RNA聚合酶Ⅲ的转录终止子。
在细胞内，shRNA转录产物经过Dicer酶加工后形成siRNA，随后与RISC复合物结合，特异性识别并降解靶mRNA分子，从而抑制目标基因的表达。这种技术为基因功能研究、信号通路分析和基因治疗开发提供了强有力的工具。
1、确定靶基因信息：根据客户提供基因的NCBI号或序列确保所选靶点序列的特异性。
2、设计合成shRNA：基于靶基因序列设计特异性shRNA序列并合成。
3、构建载体：将设计好的shRNA序列构建到载体中，并转化至感受态细胞，并通过抗生素筛选阳性克隆。
4、测序验证：从阳性克隆中提取质粒后，进行测序验证，确保shRNA序列正确插入且无突变。
5、扩增：对经过验证的正确克隆进行扩增提取。
攸碧艾欢迎您来电咨询实验服务，联系电话：400-681-8582。