操作说明
贴壁细胞
1. 吸去细胞培养液,用无菌的PBS或无血清培养液洗涤细胞去除残余的血清。
2. 加入适量本产品覆盖细胞,室温静置消化1-5 min。
3. 显微镜下观察,当细胞出现明显收缩(用移液枪轻轻吹打细胞较容易将细胞吹打下来),吸除胰酶细胞消化液,加入含血清的细胞培养液,轻轻吹打细胞,制成细胞悬液,即可直接传代培养。如果用移液枪轻轻吹打时很难使细胞从板底脱落,表明消化时间不够,可加入胰酶细胞消化液重新消化。注意避免过度消化
注意事项
1. 由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况。
2. 本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染。
3. 本产品不宜4℃长期保存,避免反复冻融,建议分装成小份后-20℃保存。
4. 对于胰酶中EDTA、酚红的选择,可以根据实验需要,对于一般的肿瘤细胞,选择含EDTA的胰酶消化液。对于较敏感、脆弱的细胞,例如原代细胞及很容易消化的细胞,选择不含EDTA的胰酶消化液,如果细胞特别敏感,需要选择胰蛋白酶浓度更低的消化液。如果是需要用于流式细胞仪检测细胞凋亡,则选用不含EDTA的胰酶消化液。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。